在液相色谱（LC）的日常使用中，“堵” 和 “漏” 是最常见的两大 “病症”—— 它们不仅会导致仪器压力异常、基线波动、保留时间漂移，严重时还会损坏核心部件（如泵、色谱柱），影响实验结果的准确性。要解决这两个问题，需先明确 “堵” 和 “漏” 的常见位置、成因，再针对性排查处理。

一、“堵”：流路不畅的核心问题

“堵” 本质是液相色谱流路中（如管道、色谱柱、阀门等）出现固体杂质或析出物，导致流动相无法顺畅通过，表现为系统压力异常升高（如突然超过正常压力上限）、流量不稳定，甚至完全断流。

1. 常见 “堵点” 及成因

液相色谱的流路从 “流动相瓶” 到 “检测器出口” 是连贯的，“堵点” 多集中在易截留杂质或易析出物质的部位：

溶剂过滤器（吸滤头）：直接接触流动相，若流动相未过滤、瓶中有沉淀（如缓冲盐结晶），或长期使用后吸附了微生物 / 颗粒物，会堵塞滤头孔隙。

单向阀：控制流动相单向流动的核心部件，内部有宝石球和阀座。若流动相中含微小颗粒，会卡住宝石球；若缓冲盐在阀内析出，会导致密封不严，间接引发 “假性堵塞”（压力波动）。

进样阀：进样时样品直接通过，若样品未过滤（含颗粒物）、进样量过大导致过载，或样品中的高浓度盐 / 有机物在阀内残留析出，会堵塞定量环或转子密封槽。

色谱柱：最核心的分离部件，固定相（如 C18 硅胶）的孔径仅几微米到几十纳米。若样品含颗粒物、未去除蛋白 / 油脂等大分子，或流动相中的盐在柱内析出，会堵塞固定相孔隙，甚至导致柱头塌陷。

检测器流通池：孔径极小（通常 < 1mm），若前序流路的杂质未被截留（如色谱柱柱头塌陷后漏出的填料），会直接堵塞流通池，导致压力骤升。

2. “堵” 的解决与排查步骤

解决 “堵” 的核心是 “定位堵点→清除堵塞物→预防再次堵塞”，可按以下步骤排查：

第一步：定位堵点

通过分段测试压力判断：关闭泵，断开某部件（如先断开色谱柱，仅测试 “泵→进样阀→检测器” 的压力；再断开检测器，测试 “泵→进样阀” 的压力），对比各段压力是否正常（正常压力范围需结合仪器型号，如常规分析柱系统正常压力多在 5-20 MPa）。

若断开色谱柱后压力恢复正常：堵点在色谱柱或其后的流路（如检测器）。

若断开进样阀后压力恢复正常：堵点在进样阀或之前的流路（如单向阀、溶剂过滤器）。

第二步：针对性处理 “堵点”

溶剂过滤器堵塞：取下滤头，用 30% 硝酸浸泡 1 小时（去除金属杂质）或甲醇超声 15 分钟（去除有机物），蒸馏水冲洗后晾干；若堵塞严重（如滤头变色、孔隙完全堵死），直接更换新滤头。

单向阀堵塞：拆开单向阀（需按仪器说明书操作），用甲醇或异丙醇超声清洗宝石球和阀座（去除颗粒物）；若有盐析出，可用热水超声（溶解盐类）；若宝石球或阀座磨损（如卡顿无法复位），需更换单向阀。

进样阀堵塞：用 “洗针液”（如甲醇 - 水）反复冲洗定量环，或手动进样 “强溶剂”（如纯甲醇）冲洗；若转子密封槽堵塞，可在仪器上执行 “阀清洗程序”（大流量冲洗密封面）；若堵塞物为盐，可用热水冲洗。

色谱柱堵塞：先尝试 “反冲”（将色谱柱反向连接，用低流速纯溶剂冲洗柱头，如 C18 柱用纯甲醇），去除柱头残留的颗粒物；若反冲无效，可挖去柱头最上层 1-2mm 的污染填料（需专业操作，避免破坏柱床）；若柱效已严重下降（如理论塔板数骤降），需更换新柱。

检测器流通池堵塞：断开流通池，用注射器注入甲醇或热水（针对盐堵）缓慢冲洗；若堵塞严重，需联系厂家更换流通池。

3. “堵” 的预防：比处理更重要

“堵” 的核心是 “杂质进入流路”，预防需从源头控制：

流动相预处理：所有流动相（包括水、有机溶剂、缓冲盐）必须经 0.45μm 滤膜过滤（水相 / 缓冲盐用水系滤膜，有机相用有机系滤膜）；缓冲盐溶液需现配现用，避免长期放置析出结晶；含易滋生微生物的流动相（如纯水相）需添加防腐剂（如 0.01% 叠氮化钠）。

样品预处理：样品需经离心（12000rpm，10 分钟）或 0.22μm 滤膜过滤（去除颗粒物）；含蛋白、油脂等大分子的样品，需先经固相萃取（SPE）或蛋白沉淀处理，避免污染色谱柱。

日常维护：

每次实验结束后，用纯溶剂（如甲醇）冲洗系统 30 分钟以上（尤其用了缓冲盐后，需彻底冲洗残留盐，避免析出）；

长期不用仪器时，溶剂过滤器需浸泡在甲醇中（避免微生物滋生）；

定期（如每月）检查单向阀、溶剂过滤器状态，及时清洗或更换。

二、“漏”：密封失效的典型表现

“漏” 是流动相从流路的密封部位（如接头、密封圈）渗出，表现为仪器表面有液滴、系统压力异常降低（如压力骤降且流量不足）、基线噪音增大（漏液进入检测器光路），严重时会导致流动相浪费、实验环境污染，甚至损坏电路部件。

1. 常见 “漏点” 及成因

“漏” 的核心是密封部件失效，常见漏点集中在 “需要拆卸连接” 或 “长期摩擦 / 受压” 的部位：

管路接头：最常见漏点。若接头未拧紧（力度不足）、过度拧紧（导致螺纹滑丝），或接头 / 管路内壁有划痕（如多次拆卸磨损），会导致密封不严。

泵密封圈（柱塞杆密封）：泵的柱塞杆反复运动，密封圈长期摩擦会老化、磨损；若流动相含颗粒物，会加速密封圈划伤，导致流动相从柱塞杆与密封圈的缝隙漏出。

进样阀密封圈（转子密封）：进样阀的转子与定子长期旋转摩擦，或样品中的强腐蚀性物质（如强酸、强碱）侵蚀密封圈，会导致密封失效，漏液从进样口或废液口渗出。

色谱柱接口：色谱柱两端的接头若未与仪器管路对齐（如角度偏差）、接口磨损，或柱端筛板松动（如反冲时压力过大），会导致漏液。

检测器出口：若检测器流通池出口管路堵塞（如之前的 “堵” 未解决），压力过高会顶开出口接头，导致漏液。

2. “漏” 的解决与排查步骤

解决 “漏” 需先找到漏点（肉眼观察或用滤纸排查），再根据漏点类型处理：

第一步：定位漏点

开机后观察仪器表面，重点检查：接头连接处（用滤纸擦拭，若滤纸变湿则为漏点）、泵的柱塞杆附近（是否有液滴）、进样阀废液管（是否漏液）、色谱柱两端接口（是否有结晶或液痕）。

第二步：针对性处理 “漏点”

管路接头漏液：先关闭泵，松开接头后重新对齐（确保管路与接头同轴），再用手轻轻拧紧（液相接头多为 “手紧 + 半圈”，避免用工具过度拧紧）；若接头磨损（如螺纹滑丝），直接更换新接头。

泵密封圈漏液：若漏液轻微，可先检查流动相是否洁净（避免颗粒物磨损）；若漏液严重（如柱塞杆有明显液痕），需按说明书更换密封圈（注意型号匹配，如 PEEK 材质耐有机溶剂，PTFE 材质耐酸碱）。

进样阀转子漏液：执行 “阀清洗” 程序，去除残留污染物；若漏液持续，说明密封圈老化，需更换转子密封组件（更换时注意清洁，避免杂质进入）。

色谱柱接口漏液：重新对齐色谱柱与管路接口，轻轻拧紧；若柱端筛板松动，需联系厂家维修（不可自行拆卸）；若接口磨损，更换色谱柱接头。

检测器出口漏液：先排查是否因流通池堵塞导致压力过高（参考 “堵” 的处理），疏通后再重新拧紧出口接头。

3. “漏” 的预防：减少密封部件损耗

规范操作连接部件：安装接头时确保 “对齐同轴”（避免角度偏差导致磨损），拧紧力度以 “不漏液” 为原则（无需过度用力）；拆卸时用专用工具（如扳手），避免徒手硬拧。

避免腐蚀性物质损伤：若样品 / 流动相含强酸、强碱或强有机溶剂（如二氯甲烷），需选择耐腐蚀性密封圈（如 PEEK 材质），并缩短实验后冲洗时间（及时用中性溶剂冲洗）。

定期更换易损件：密封圈、转子密封等属于消耗品，需根据使用频率定期更换（如常规实验每 3-6 个月检查一次，高频使用每月检查）。

总结：“堵” 和 “漏” 的核心应对逻辑

堵：防大于治—— 通过 “过滤（流动相、样品）、清洗（实验后及时冲系统）、避免盐析出（不用时用纯溶剂保存）” 减少杂质进入流路，从源头降低堵塞风险。

漏：规范 + 维护—— 通过 “正确连接、避免过度用力、定期更换易损件” 保护密封部件，发现漏液及时处理（避免压力异常加剧磨损）。

掌握这两大 “病症” 的排查逻辑后，日常使用中可通过 “压力监测（堵）” 和 “目视检查（漏）” 提前预警，将故障解决在萌芽阶段，既能延长仪器寿命，也能保证实验结果的