在高效液相分析检测样品的过程中,色谱柱会受到来自于样品及色谱系统的污染,从而导致色谱柱耐用性差、寿命缩短。
济南色谱级试剂彪仕奇:特别是对于中药、天然产物、合成中间体及生物药品的检测,因基质的复杂性,色谱柱受污染的情况会更加严重。污染会导致色谱系统压力升高、色谱柱塌陷、填料变色等,从而带来检测成本高,测试结果不准确等各种影响。
保护柱也可装填和分析柱不同的填料,如较粗颗粒的硅胶(10~15um)或聚合物填料,但甲醇生产厂彪仕奇提醒大家,柱体积不宜过大,以降低柱外效应的影响。
保护柱装填的填料较少,价格较低,其为消耗品,通常可分析50~100次样品,柱压力降呈现增大的趋向就是需要更换保护柱的信号。
现在市场供应的有结构新颖可更换柱芯式设计的保护柱,由保护柱套和可更换式保护柱芯两部分组成。
对硅胶基体的键合固定相,流动相的pH值应保持在2.5~7.0之间。具有极端值的流动相会溶解硅胶,而使键合相流失。
使用水溶性流动相时,为防止微生物繁殖引起柱阻塞,应加入0.01%的叠氮化钠,以抑制微生物的繁殖。对不洁净的样品,要使用0.45um滤膜过滤或经固相萃取器净化后再进样。
对反相C18键合相柱,除去柱中含有的缓冲溶液盐类或水溶性物质时,不应使用纯水冲洗。因为C18键合相像一条长链将硅胶黏结,当有有机溶剂存在时,其表面被流动相润湿,C18长链完全展开,像海水中的海藻一样。当纯水或缓冲溶液通过时,C18键合相与其不浸润,键合相表面会塌陷,从而将溶剂、样品分子或无机盐分子包合。此时仅用纯水无法将包合物洗脱出,应使用含5%有机溶剂的水溶液冲洗,才可清除无机盐或水溶性物质。
硅胶、氧化铝或正相键合相柱,应保存在流动相中。氰基柱不能保存在纯有机溶剂(如甲醇或乙腈)中,应保留在欲使用的流动相中;氨基柱最好保存在乙腈中,而非流动相,并且应注意不可使用丙酮作流动相。C18反相柱应保存在纯甲醇溶剂中,对填充高交联度苯乙烯-二乙烯基苯共聚微球的非极性固定相也可用此法保存。
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